冰冻干燥红细胞超微结构的分析

论著。
冰冻干燥红细胞超微结构的分析韩颖，刘安，靳鹏，任素萍，权国波，马恩普，刘秀珍军率医学，学院输血研究所，北京100850为4.40.4，0.17±0.05和2.35±0.46.对电镜下红细胞平均直径平均光密度及积分光密度数据进行统计学处17差分析的微；山检验显，组3与组2之间无显著差异，组3与组1相比较差异显著。结论冰冻干燥，1具有相对完整的超微结构，平均直径及血红蛋白的含量与冰冻保存红细胞相似。
红细胞冰冻下燥保技术是国外近年来发展的血液保存方法3.与4及冰冻条件下血液保存技术相比坑这种方法几有+需要特殊的保作设备保存时间长和储存运输方便等特点，非常适合定条件下的紧急输血之用。本文观察冰冻干燥保存红细胞超微纳构的变化。
材料与方法仪器与试剂仪器电镜荷兰，1中8公司。红细胞变形仪上海医疗仪器厂，像分析仪上海医疗仪器厂，试剂聚乙烯吡咯烷酮30，相对分又帚300008.预处理保存液葡萄糖氯化钠磷酸氢钠磷酸氢钠磷酸氢铵。冰冻干燥保存液聚乙烯吡略，酮。再水化液葡萄糖氯化钠磷酸氢钠磷酸氢钠磷酸氢铵和腺嘌呤。
土4型冰冻，燥机德国，1公金项目本课为国家自然科学基金资助项目编号50076046和全军九重点课基金资助项目编号982063通讯作者韩颖，副研宄员硕士电话01066932200.传真方法实验分组组1为正常红细胞纟。；饥2为甘油冰冻红细胞组；纟13为17冰冻干燥红细胞组，正常红细胞组取新鲜红细胞，人抗凝，40放置不超过24小时，部分用于电镜检测，另部分用于冰冻及冰冻千燥研究。
冰冻红细胞组取新鲜血，1500，离心10分钟，收集红细胞1以等渗生理，水洗涤2次，按照常规力口入35甘油保护液4，8，保存24小时，取出后，洗去甘油，等渗生理盐水重悬细胞，待进行电镜分析。
冰冻干，红细胞组红细胞预处理红细胞经过洗漆后加入等体积预处理缓冲液，4孵育5小时，离心4集红细胞。预冻冰冻干燥样品的体积为红细胞数1.52.012.加样完毕后，将体系在液氮气相平衡30分钟。冰冻干燥将样品移入冰冻千燥机中冰冻干燥16小时，冰冻干燥机的冷阱温度为50，隔板温度为12真空度1必。冰冻干燥红细胞的再水化取冰冻干燥红细胞，加入再水化缓冲液，对部分细胞进行电镜观察，同时与正常红细胞及冰冻细胞进行对照。
细胞回收率计算电镜下，计数个细胞，细胞中血红蛋白均匀分布细胞膜完整为正常红细胞。用密度及积分光密度进行分析。
结果冰冻干燥红细胞具有相对正常的形态结构3组红细胞在电镜下比较扫描电镜下，新鲜正常红细胞具有圆盘状结构，认，冰冻红细胞多为正常形态，偶多棘突细胞，把3，冰冻干燥红细胞，具有圆盘状结构，104，但是部分红细胞士球形。个别细胞育漏孔形成，1.透射电镜下3组红细胞形态2，冰冻干燥组中可以到完整的红细胞，血红蛋白均匀分布，20化但是，部分红细胞呈网状，2扮。冰冻干燥红细胞的回收率为53.
不同保存方法红细胞平均直径平均光密度细胞积分光密度的比较付常冰冻及冰冻干燥红细胞的透射电镜结采进行像分析的结果附。采用元方差分析的83检验，冰冻干燥重悬浮红细胞平均直径平均光密度及积分光密度的总体水平观察与冰冻保存组无显著差别尸=0.5784；与正常细胞组有显著差异户=0.0015，其中两组间细胞积分光密度指标差异显著，户=0.0418.
讨论冰冻干燥保存后红细胞仍然具有相对正常的形态结构。红细胞的主要功能妃远送闱气和。氧化碳，在生理状态下，红细胞呈双凹型结构，细胞内为均质的血红蛋白。冰冻十燥后，以缓冲液重姑红细胞，红细胞超微结构上仍然维持了较好的形态，在外形上尽矜出现球形转变，细胞平均径小于正常细胞，似是常规冰冻保存的红细胞的体积无显著的差别，血红蛋白均匀分布于细胞内，细胞平均光密度与积分光密度与冰冻法保存组无以著的差，何纪数值于正常组，推测为细胞体积变小，血红蛋白固缩所致。
冰冻十燥保存红缩胞出现脱的损忉，描屯镜发现个别的细胞发生细胞膜漏孔损伤的改变；透射电镜下，个别红细胞呈网状。防止红细胞膜的损伤是红细胞体外保存的主要难，在冰冻干燥保存过程导致红细胞脱损伤的核以5诸如冷冻的温度冰晶的形成，冰冻干燥过程的次冰晶的形成。再水化溶液的渗。透压等，冰品的形成及细胞内外渗透压的改变使细胞形成漏孔，甚至膜破坏，血红蛋白外溢。
目前，临床常用的红细胞保存方法主要有4保存和冰冻保存，红细胞的冰冻干燥保存是近年来出现的红细胞保存的种新的策略，这种保存方法保存的红细胞具有相对正常的结构和功能。我们的初步研宄明，冰冻干燥后红细胞仍然具有相对正常的形态；细胞均。1径光密度和枳分光密度总体水平与正常红细胞存在显著性差异，但是与冰冻保存红细胞无显著的差异，有关冰冻干燥保存后的红细胞功能研宄正在进行中。